本作延续上一部的二人组光之美少女作为故事的开始架构，并加入了“音乐”要素贯遍本作。在本作品的标题上的“Suite”表示音乐用语的“组曲”，其最主要表达的是“音乐与友情”。东映动画制作人梅泽淳稔表示“用传说的乐谱的飞散音符等要素来当主题内容，是系列中空前的最大规模来描绘音乐”。在充满音乐风情的城市“加音町”成长的“北条响”和“南野奏”，两人是青梅竹马。各自升上国中后总合不来，两人见面只有争吵。但却因听“音乐”的相同兴趣而相连。某日响与奏正巧在旧歌剧院撞见时，从音乐王国“大调岛”来的精灵“哈咪（Hummy）”出现了！为了阻止“小调岛”的敌人将传说的乐谱中“幸福的旋律”变为“不幸的旋律”音符，所以找寻能够以“高音谱记号”变身为光之美少女的响与奏。以二人合而为一的正义之心，一齐找寻飞散到人间旋律音符，和小调岛的敌人来了一场音符抢夺战！

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